膽道閉鎖(biliary atresia，BA)是?以肝內外膽道系統進行性炎癥及纖維化閉鎖持續進展為主要病理特征，造成嚴重的膽汁淤積和膽汁性肝硬化的肝膽疾病。BA晚期可出現門靜脈高壓和肝衰竭，患兒如未能得到及時救治多在1~2年內死亡，是嬰幼兒時期最常見的導致死亡的肝膽疾病，也是小兒肝移植最常見的適應證。BA的發病率為0.55-1.3/10000名活嬰，中國上海地區膽道閉鎖發病率為10.86/10000名活嬰，遠高于歐美國家。Kasai 手術是 BA 治療的首選方式。BA患兒預后與手術時年齡密切相關，早期診斷和及早進行Kasai手術能夠顯著改善此病預后，減少肝移植。然而，由于臨床、生化、影像學和組織病理學特征相似，在疾病早期識別BA與其他嬰兒膽汁淤積癥仍然具有挑戰性，導致BA患兒Kasai手術時年齡偏大，預后較差。

隨著質譜技術的進一步普及和代謝組學的快速發展，人們發現膽汁酸代謝改變與肝損傷和膽汁淤積密切相關，而特定的膽汁酸可能是區分BA可靠的生物標志物。

一、特定膽汁酸與BA診斷

除BA外，Alagille綜合征，Caroli綜合征和家族性膽汁淤積綜合征(PFIC)等疾病也會導致患兒產生膽汁淤積的癥狀。對于BA患兒，往往早期認識不足，沒有進行合理的檢查和診斷，給予相應的治療和建議，多數情況下按照新生兒肝炎綜合征或母乳性黃疸進行保守治療，而治療效果不佳時，才想起來是否為外科性黃疸引起的膽道進行性梗阻，這時多數患兒已失去最佳的治療時機。2018年的一項研究結果顯示，BA患兒和膽道淤積的非BA患兒膽汁酸存在顯著差異，BA患兒血清甘氨鵝脫氧膽酸(GCDCA)和牛磺鵝脫氧膽酸(TCDCA)的含量顯著高于膽道淤積的非BA患兒。根據ROC曲線，當GCDCA切值為30μM時，其在BA診斷中的敏感性為100%，特異性為83.3%，陽性預測值為88.9%，陰性預測值為100%，可有效識別BA患兒和膽道淤積的非BA患兒。

其中，在高危組中，評分> 35 分的 BA 估計風險為 > 95.5%，驗證隊列中得分較高的所有患者最終被診斷為 BA。該評分系統為臨床提供了一種無創診斷方法來鑒別嬰兒BA和膽汁淤積。

此外，新生兒肝炎綜合征（NHS）是新生兒膽汁淤積的另一個主要原因，通常會與BA診斷混淆，但兩者的膽汁酸亞型有顯著差異。與NHS患者相比，BA患者TCDCA水平更高，CDCA水平更低。BA患者的TCDCA/CDCA升高，可用于區分BA和NHS患者，其ROC曲線下面積為0.923。

BA患兒有特定的膽汁酸模式，通過定量檢測特定膽汁酸的含量并結合相關的算法，可有助于準確、快速和非侵入性的BA診斷。

二、膽汁酸譜與Kasai手術預后

嬰兒發生膽道閉鎖后需接受Kasai手術，若術后患兒高膽紅素水平持續升高則需進行肝移植，但術后膽紅素水平正常也不意味著就有好的預后，臨床上仍缺乏精準的預測指標。今年的一項前瞻性研究結果顯示，血清總膽汁酸水平與Kasai術后膽紅素水平正常的嬰兒預后情況相關。該研究入組Kasai術后六個月、總膽紅素水平正常的患兒，共收集血清樣本137例并進行膽汁酸水平檢測，根據膽汁酸水平將患兒分為低BA組(BA ≤ 40 μmol / L, n = 43)和高BA組(BA > 40 μmol / L, n = 94)，并進行隨訪。在隨訪期間發現低BA組的患兒發生脾腫大、腹水、胃腸道出血或門靜脈高壓癥的可能性降低。低BA組肝移植/死亡的10年累積發生率為8.5%，顯著低于高BA組的42.9%。因此，對于Kasai術后膽紅素水平正常的嬰兒，可檢測血清膽汁酸水平，預測其預后情況，及時干預。

綜上所述，檢測BA患兒血清膽汁酸，尋找診斷BA的敏感指標，可為早期識別BA提供新的方法和方向，幫助臨床醫生實現BA的早診斷，早手術，以降低肝移植概率。另外，術后膽汁酸檢測，也預測Kasai術后膽紅素正常患兒的預后情況！

三、方法學優勢（液相色譜-串聯質譜法）

1、前處理僅需蛋白沉淀，簡單快速，適用于全自動樣本處理平臺，有利于提高處理通量。

2、檢測指標更全面，僅需50μL血清，可同時檢測17種膽汁酸，對體內膽汁酸評估更全面。

3、膽汁酸同分異構體分離效果更好，膽汁酸定量結果更準確。

四、膽汁酸譜檢測試劑產品

檢測試劑盒

樣本釋放劑（膽汁酸蛋白沉淀法） 

滬閔械備20190076 號

檢測指標

膽酸(CA)

熊脫氧膽酸(UDCA)

鵝脫氧膽酸(CDCA)

石膽酸(LCA)

脫氧膽酸(DCA)

牛磺膽酸(TCA)

牛磺脫氧膽酸(TDCA)

牛磺石膽酸(TLCA)

牛磺熊脫氧膽酸(TUDCA)

牛磺鵝脫氧膽酸(TCDCA)

甘氨膽酸(GCA)

甘氨石膽酸(GLCA)

甘氨脫氧膽酸(GDCA)

甘氨熊脫氧膽酸(GUDCA)

甘氨鵝脫氧膽酸(GCDCA)

甘氨豬去氧膽酸(GHDCA)

牛磺豬去氧膽酸(THDCA)

樣本類型

血清

試劑規格

96測試/盒

目前，上海睿康生物科技有限公司已基于LC-MS/MS平臺開發出17種膽汁酸的檢測試劑盒，可檢測常見的初級膽汁酸和次級膽汁酸，助力于BA的無創診斷與預后監測！

參考文獻：

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